EZ-editor™ 猪sgRNA敲除质粒混合文库


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EZ-editor™ 猪sgRNA敲除质粒混合文库

EZ-editor™ 猪sgRNA敲除质粒混合文库

货号： LIBR-PG002-P100 LIBR-PG002-P200 LIBR-PG002-P500

规格 ： 100ug 200ug 500ug

说明书：

立即订购
产品详情 推荐搭配
本敲除文库适用于猪全基因组的敲除和筛选，靶向猪全基因组的22661个基因，共包含123951个敲除载体，针对每个基因有5个gRNA敲除载体，另有2,000个对照载体(包含2000个靶向非基因序列)。文库采用YCS-LV002骨架，是all in one载体系统，即gRNA和Cas9基因是在同个载体上的，可单独使用。
产品名称
EZ-editor™ 猪sgRNA敲除质粒混合文库
英文名称
Pig CRISPR Knockout Pooled Library
物种
Pig
文库种类
敲除文库
质粒系统
单质粒系统
病毒包装系统
第三代病毒包装系统
靶向基因
22661
gRNA数量
123951
非靶标对照sgRNA数量
2000
标签
Hygro
骨架图谱
YCS-LV002 vector formula
点击查看完整大图
CRISPR iScreen™产品优势
  • 35种文库
    近100种Cas9细胞
    35种文库现货供应，多种类型可选。Cas9细胞代次低、活性高、状态好，轻松加快CRISPR文库构建。
    1
  • 质粒
    覆盖度>99%,均一性＜10
    使用自主研发感受态细胞，更易捕获外源DNA，转化效率高且突变风险低。
    2
  • Cell Pool
    覆盖度高达99%
    独家Cell Pool制备工艺,实现规模化、标准化生产，确保批间差异小、重复性好。
    3
FAQs
1
文库质粒扩增怎么保证sgRNA的覆盖度？
文库质粒扩增需使用高效电转感受态细胞，并使用电转的方法转化质粒；同时电转后长菌数量需大于300x（长菌数 > sgRNA条数*300），才能有效确保扩增的质粒sgRNA覆盖度不受影响。
2
怎么更换文库质粒抗性？
区别于常规质粒抗性改造，文库质粒抗性改造不能直接用文库质粒进行，因为这样会导致sgRNA序列大量丢失。更换文库质粒抗性需要先对文库质粒骨架进行改造，再将sgRNA序列通过同源重组的方法整合至改造过的文库质粒骨架上。
3
怎么检测文库质粒中sgRNA的覆盖度与均一性？
文库质粒中sgRNA的覆盖度和均一性需要通过NGS测序的方法进行检测。具体来说，在sgRNA序列两端设计引物后，使用高保真酶对文库质粒进行扩增，随后将扩增片段用于NGS测序和分析。
4
文库质粒PCR扩增的片段大小是多少？
目前测序方法主要使用PE150，也即双端150bp测序读长，总读长为300bp，为确保sgRNA信息能够被识别，建议PCR扩增的片段大小不超过300bp。
5
文库质粒能否直接用于构建文库细胞？
文库质粒不能直接用于构建文库细胞，使用文库质粒以瞬转的方式转染至细胞后，sgRNA序列无法整合到基因组上；虽然细胞发生了不同的基因编辑，但是后续无法通过NGS测序检测细胞中剩余的sgRNA序列。
点击获取CRISPR文库筛选指南>>

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CRISPR文库服务
提供CRISPR-KO、CRISPRa、CRISPRi三大定制文库从高通量sgRNA文库构建到病毒包装、细胞转染、药物筛选、高通量测序和数据分析等一站式服务，多种交付方式满足不同科研需求。
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规格 ： 100ug 200ug 500ug

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本敲除文库适用于猪全基因组的敲除和筛选，靶向猪全基因组的22661个基因，共包含123951个敲除载体，针对每个基因有5个gRNA敲除载体，另有2,000个对照载体(包含2000个靶向非基因序列)。文库采用YCS-LV002骨架，是all in one载体系统，即gRNA和Cas9基因是在同个载体上的，可单独使用。

产品信息

产品名称
EZ-editor™ 猪sgRNA敲除质粒混合文库
英文名称
Pig CRISPR Knockout Pooled Library
物种
Pig
文库种类
敲除文库
质粒系统
单质粒系统
病毒包装系统
第三代病毒包装系统
靶向基因
22661
gRNA数量
123951
非靶标对照sgRNA数量
2000
标签
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骨架图谱
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CRISPR iScreen™产品优势
  • 35种文库
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    35种文库现货供应，多种类型可选。Cas9细胞代次低、活性高、状态好，轻松加快CRISPR文库构建。
    1
  • 质粒
    覆盖度>99%,均一性＜10
    使用自主研发感受态细胞，更易捕获外源DNA，转化效率高且突变风险低。
    2
  • Cell Pool
    覆盖度高达99%
    独家Cell Pool制备工艺,实现规模化、标准化生产，确保批间差异小、重复性好。
    3
FAQs
1
文库质粒扩增怎么保证sgRNA的覆盖度？
文库质粒扩增需使用高效电转感受态细胞，并使用电转的方法转化质粒；同时电转后长菌数量需大于300x（长菌数 > sgRNA条数*300），才能有效确保扩增的质粒sgRNA覆盖度不受影响。
2
怎么更换文库质粒抗性？
区别于常规质粒抗性改造，文库质粒抗性改造不能直接用文库质粒进行，因为这样会导致sgRNA序列大量丢失。更换文库质粒抗性需要先对文库质粒骨架进行改造，再将sgRNA序列通过同源重组的方法整合至改造过的文库质粒骨架上。
3
怎么检测文库质粒中sgRNA的覆盖度与均一性？
文库质粒中sgRNA的覆盖度和均一性需要通过NGS测序的方法进行检测。具体来说，在sgRNA序列两端设计引物后，使用高保真酶对文库质粒进行扩增，随后将扩增片段用于NGS测序和分析。
4
文库质粒PCR扩增的片段大小是多少？
目前测序方法主要使用PE150，也即双端150bp测序读长，总读长为300bp，为确保sgRNA信息能够被识别，建议PCR扩增的片段大小不超过300bp。
5
文库质粒能否直接用于构建文库细胞？
文库质粒不能直接用于构建文库细胞，使用文库质粒以瞬转的方式转染至细胞后，sgRNA序列无法整合到基因组上；虽然细胞发生了不同的基因编辑，但是后续无法通过NGS测序检测细胞中剩余的sgRNA序列。
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